1.3 未成熟卵母細胞的收集q49IVF導航

在B超下經陰道穿刺取卵技術已經成為目前普遍使用的取卵技術。取未成熟卵子的具體操作事宜和IVF周期的卵子獲取相似。取卵一般使用小口徑針頭（19G或20G),這樣可以減少患者的痛苦和對于小卵泡的損傷，因此可以允許收集更多的未成熟卵子。q49IVF導航

因為小卵泡內的壓力已經很高，吸引器的吸力應降低到85mmHg,即正常IVF周期取卵吸力的一半。過高的吸力會造成裸卵比例增加 。高質量的超聲波掃描成像是成功取卵的一個關鍵。卵泡的大小不一，而且一些特定的卵泡也許很難被吸??；即使它們被吸取，也可能不會從中獲取到卵子，特別是那些很小的卵泡（直徑<4mm)。吸取液被收集在一個盛有2ml含肝素的培養液的10ml試管里面（一般含有2單位/毫升的肝素)。q49IVF導航

與收集IVF的周期的卵子相似，操作人員首先在解剖顯微鏡下找出顆粒細胞-卵母細胞復合體(cumulus-oocyte complexes,COC)。用常規的方法來識別被很緊湊的顆粒細胞包圍的小卵泡是件困難的事情，因為它們很容易被疏忽。一個方法是利用細胞過濾網（cell strainer)來輔助撿卵，將卵泡液在細胞過濾網上面過濾（70µｍ)。過濾后收集到的組織再次被提前預熱的沖洗液進行沖洗，隨后被轉移到一個培養皿里面來再次尋找剩余的未成熟卵子。一切操作需要在37℃的熱臺上完成。初步鑒定卵子是否成熟，一個特殊的找卵方法叫做“滑動法(sliding method)”。即在解剖顯微鏡下，COC隨著皿的來回傾斜，被培養液帶動著在皿底來回滑動。在滑動的過程中，操作者可以清楚地識別出，卵母細胞的胞質中含有GV，或在卵間隙中出現了第一極體。如果以上兩種情況都沒有出現，則說明卵母細胞正處于GVBD期（ΜⅠ期)。q49IVF導航