1.6 培養方式XsUIVF導航

1.6.1  無油覆蓋培養與有油覆蓋培養XsUIVF導航

在胚胎培養中應用油的原因包括：在大氣壓下觀察胚胎時有助于維持pH穩定，保護培養基無菌，防止蒸發，尤其是微量液滴時。另外，有或無油可能對培養基中的實際氧分壓產生極深的影響。細胞氧氣利用率的維持部分依賴于培養系統中的氧氣的溶解度和擴散率。如果油層限制了大氣和培養基之間的氣體交換，它可能有助于在細胞周圍維持一種有利的、低氧（通過呼吸產生）的微環境。另外一種可能性就是油能夠作為聚集于液體環境中的毒性物質的洗滌槽。與未蓋油的培養基相比，囊胚形成率在蓋油的微滴培養基中明顯高。XsUIVF導航

平衡好的礦物油有特殊的作用：作為一個物理屏障，阻斷培養液微滴和環境以及空氣傳播的微粒和病原菌之間的結合，防止揮發和減慢氣體的擴散，因此在配子操作過程中可以保持pH、溫度和滲透壓的穩定，防止胚胎所在微環境的過大波動。防止蒸發，高濕度和預平衡的礦物油也可以放在無濕度的培養箱中，更易于清潔和保持。XsUIVF導航

另外，礦物油能吸收培養基中的脂溶性毒物，有利于胚胎的發育。由于油的物理特性導致了氣體的揮發緩慢，所以應該提前平衡，不提前平衡的油能夠從培養基中吸收氣體，造成偏堿的pH，對配子和胚胎有不利影響。覆蓋有油的培養小皿必須放在培養箱內平衡1小時以上才能將配子或胚胎移入其中。XsUIVF導航

1.6.2 結合培養與單胚胎培養 XsUIVF導航

  （―）單胚胎培養XsUIVF導航

在一定條件下。單個胚胎在體外培養系統中也能生存和增殖生長，有很強的獨立性。采用單胚胎培養比較便于觀察，有連續性。在進行單個胚胎培養時應進行微滴培養，并且蓋油。XsUIVF導航

（二）集合培養XsUIVF導航

集合胚胎培養是指在培養基內將多個胚胎一起培養，培養液的景相對多，一般為1ml左右。這種方式中由胚胎分泌的一些代謝物質會被稀釋變得無害。單個胚胎雖然能生長繁殖，但不如結合胚胎生存力強，胚胎量多時比少時易于培養。鼠胚試驗已經證實當10個左右的胚胎一起培養，可以獲得更好的卵裂率及囊胚形成率。6個月內，72名可獲得9個及更多受精卵的患者參加了這項前瞻性研究。一共936個受精卵被分成三個亞組（單獨培養、相鄰很近的單獨培養以及結合培養），均被置于30μl的液滴（第3天換培養液）中培養直到嚢胚形成。第5 天，進行單囊胚移植并且其他高質量的囊胚玻璃化冷凍保存。IVF的受精率為69% 而ICSI的受精率為81%。囊胚形成率為48% 。單囊胚移植的臨床妊娠率為54% 。結合共培養與單獨培養相比，在致密化率（p<0.01）及囊胚形成率（P<0.01）方面均更有優勢。結合共培養租獲得的囊胚治療更好（P<0.05）。隨之而來的是，結合培養組的囊胚獲得了更多的活產率。就目前所知，這是第一份證據證明結合培養可以改善人類胚胎植人前發育并建議可以減少培養液的體積或者增加胚胎的密度。XsUIVF導航